N 端腦鈉肽前體測定試劑盒（酶聯(lián)免疫熒光法） 說明書 IVD

【產(chǎn)品名稱】 通用名稱: N 端腦鈉肽前體測定試劑盒（酶聯(lián)免疫熒光法） 英文名稱: VIDAS NT-proBNP2 (PBN2)

【包裝規(guī)格】 60 測試/盒

【預(yù)期用途】 本產(chǎn)品用于測定人血清或血漿（肝素鋰和肝素鈉）中腦鈉肽的 N 末端片段水平。 N 端腦鈉肽前體測定試劑盒（酶聯(lián)免疫熒光法）是一種在 VIDAS 系列儀器上應(yīng)用的自動定量檢測， 采用 ELFA（酶聯(lián)免疫熒光法）技術(shù)用于測定人血清或血漿（肝素鋰和肝素鈉）中腦鈉肽的 N 末端片段 水平。VIDAS NT-proBNP2（PBN2）檢測被用作疑似心力衰竭的輔助診斷方法。 摘要和說明 心力衰竭（HF）是一種復(fù)雜的臨床綜合癥，發(fā)生這種癥狀時，心臟的泵血功能不足以滿足機(jī)體新陳 代謝的需要。最常見的癥狀是呼吸短促、疲勞、心動過速和水腫（1）。鈉肽—ANP（心房鈉肽）、BNP （腦鈉肽）和 CNP（C 型鈉肽），是心臟（ANP 和 BNP）或血管內(nèi)皮細(xì)胞（CNP）對血流動力學(xué)壓力 做出反應(yīng)所釋放的神經(jīng)激素,以調(diào)節(jié)血容量內(nèi)穩(wěn)態(tài)：血管舒張（拮抗腎素-血管緊張素系統(tǒng)）、 尿鈉排泄 （腎臟分泌鈉增多）以及利尿（2）。由于血容量擴(kuò)張或血壓超負(fù)荷引起的心肌內(nèi)壁壓力增加，會激活心 肌細(xì)胞中 BNP 基因,產(chǎn)生前體分子 proBNP。該前體分子經(jīng)進(jìn)一步裂解后釋放出具有生物活性的 C-末端片 段 BNP 以及非活性的 N-末端片段 NT-proBNP（2）。BNP 和 NT-proBNP 在血液中的濃度具有很高的相 關(guān)性，但由于半衰期不同（NT-proBNP 為 120 分鐘，BNP 為 60 分鐘），NT-proBNP 的水平比 BNP 要 高（2）。腎臟能夠等量清除這兩種分子，而 BNP 還會被鈉肽受體或神經(jīng)內(nèi)肽酶（蛋白水解）清除 （3）。NT-proBNP 的水平升高與心室功能不全以及心力衰竭嚴(yán)重程度有關(guān)（4），NT-proBNP 還可用于 檢測輕度心力衰竭（5）以及射血分?jǐn)?shù)保留的心力衰竭（6）。 B-型鈉肽被專業(yè)指南推薦用于對急性呼吸困難和疑似急性心力衰竭患者尤其是臨床無法確診的患者 進(jìn)行診斷評估（1, 7）。研究表明，在急診科疑似心力衰竭患者診斷策略中納入 NT-proBNP 檢測，能夠 有效縮短住院時間并降低花費(fèi)（8,9）。ICON 研究已經(jīng)確定了 NT-proBNP 在診斷急性心力衰竭方面的單 個排除臨界值和多個基于年齡的納入臨界值（10）。進(jìn)行 NT-proBNP 鑒別診斷也具有重要的臨床意義， 因?yàn)?NT-proBNP 的水平在其他影響心室功能的情況下也會升高，例如：肺栓塞、高血壓、心瓣膜病、心 肌病、心律失常、重癥疾病（例如：膿毒血癥）、貧血和中風(fēng)（11）。 初診時，NT-proBNP 檢測在引導(dǎo)無癥狀性慢性心力衰竭患者轉(zhuǎn)診專業(yè)科室方面尤為重要，因?yàn)樵擁?xiàng) 檢測可排除疑似左心室收縮功能不全（12）。NT-proBNP 在各種臨床情況中均有各自的預(yù)后值，包括伴 隨或不伴隨急性心力衰竭的急性呼吸困難（13）、慢性心力衰竭（14）、穩(wěn)定和不穩(wěn)定型缺血性心臟病 （15）。NT-proBNP 對肌鈣蛋白水平正常的急性冠狀動脈綜合征的預(yù)后價值越來越高（16）。NTproBNP 在急性非穩(wěn)定性心力衰竭的住院患者監(jiān)測（17）和慢性心力衰竭的治療指導(dǎo)方面（18）可作為 一種有效指標(biāo)。 VIDAS NT-proBNP2 檢測包含兩個單克隆抗體，這兩個抗體可以識別位于 proBNP（1-108）N 末端 部分（1-76）的表位。

【檢驗(yàn)原理】 一步夾心免疫法結(jié)合終點(diǎn)法熒光檢測（ELFA）。 固相管（SPR® ）作為固相和加樣器。試劑為即用型，預(yù)先分注到密封的試劑條中。 所有測定步驟均由儀器自動完成。樣品轉(zhuǎn)移到含堿性磷酸酶標(biāo)記的抗-NT-proBNP 抗體（結(jié)合物）的 小孔中。樣品/結(jié)合物混合物在 SPR 中多次循環(huán)進(jìn)出，使抗原與固定在 SPR 內(nèi)壁和結(jié)合物上的免疫球蛋 白相結(jié)合從而形成夾心。 通過洗滌步驟，去除未結(jié)合部分。 N 端腦鈉肽前體測定試劑盒（酶聯(lián)免疫熒光法） 版本號 9301622 D - 2015/01 2 然后進(jìn)行兩次檢測。在每一次檢測中，底物（4-甲基傘形酮磷酸酯）在 SPR 中進(jìn)出循環(huán)。結(jié)合物中 的酶催化底物水解成可在 450 nm 下測定其熒光的熒光產(chǎn)物（4-甲基傘形酮）。熒光強(qiáng)度與樣品中的免疫 球蛋白濃度成正比。 檢測結(jié)束后，儀器根據(jù)兩個檢測步驟對應(yīng)的兩條定標(biāo)曲線，通過熒光閾值確定每個樣品所用的定標(biāo)曲 線，自動計算結(jié)果。然后，打印結(jié)果。

【主要組成成分】 試劑盒組成 PBN2 試劑條，60 條 STR 即用型。 PBN2 固相管，60 個 2 x 30 SPR® 即用型。小鼠單克隆抗- NT-proBNP 抗體包被的固相管(SPR)。 PBN2 質(zhì)控品： C1 質(zhì)控品 1 x 2 mL（液體） C2 質(zhì)控品 1 x 2 mL（液體） C1 C2 即用型。 PBS 緩沖液 pH 7.2 + 蛋白質(zhì)和化學(xué)穩(wěn)定劑 + 含有合成 NTproBNP 肽的防腐劑。 C1 質(zhì)控品濃度大約為 3000~4600 pg/mL，C2 質(zhì) 控品濃度大約為 480~720 pg/mL，質(zhì)控品濃度具有批特異性，具體濃度 值詳見 MLE 數(shù)據(jù)。 MLE 數(shù)據(jù)將顯示以 pg/mL 為單位的置信區(qū)間（ “質(zhì)控品 C1 劑量值范圍" 或“質(zhì)控品 C2 劑量值范圍"）。 PBN2 標(biāo)準(zhǔn)品： S1 標(biāo)準(zhǔn)品 2 x 2 mL（液體） S2 標(biāo)準(zhǔn)品 2 x 2 mL（液體） S1 S2 即用型。 PBS 緩沖液 pH 7.2 + 蛋白質(zhì)和化學(xué)穩(wěn)定劑 + 含有合成 NTproBNP 肽的防腐劑。 S1 標(biāo)準(zhǔn)品濃度大約為 6100~9200 pg/mL，S2 標(biāo) 準(zhǔn)品濃度大約為 250~450 pg/mL，標(biāo)準(zhǔn)品濃度具有批特異性，具體濃度 值詳見 MLE 數(shù)據(jù)。 MLE 數(shù)據(jù)將顯示以 pg/mL 為單位的標(biāo)準(zhǔn)品濃度[“標(biāo)準(zhǔn)品（S1）劑量值"或 “標(biāo)準(zhǔn)品（S2）劑量值"]，同時顯示以“相對熒光值"表示的置信區(qū)間[“標(biāo)準(zhǔn) 品（S1）RFV 范圍"或“標(biāo)準(zhǔn)品（S2）RFV 范圍"]。 樣品稀釋液 1 x 2 mL R1 即用型。 PBS 緩沖液 pH 7.2 + 蛋白質(zhì)和化學(xué)穩(wěn)定劑 + 防腐劑。 校準(zhǔn)測試所需的出廠主數(shù)據(jù)規(guī)格書： • 試劑盒提供了 MLE 數(shù)據(jù)（主批次輸入） 或者 • 包裝盒標(biāo)簽上印有 MLE 條形碼 SPR SPR®內(nèi)壁，在生產(chǎn)過程中已經(jīng)采用小鼠單克隆抗-NT-proBNP 抗體對進(jìn)行包被。每個 SPR 均采用 “PBN2"編碼進(jìn)行識別。使用時，從袋子中取出所需數(shù)目的 SPR 管后，請立即封袋保存。 試劑條 試劑條有 10 個小孔，采用已標(biāo)記箔材封口。標(biāo)簽包含一個條形碼，主要包括試驗(yàn)代碼、試劑盒批號 和有效期。加樣時，需將第 1 孔的箔材穿孔，以便加入樣品。每個試劑條的最后一個小孔是檢測孔，用 于熒光檢測。試劑條中部的小孔中包含了試驗(yàn)所需的各種試劑。 孔 試劑 1 樣品孔。 2 - 3 - 4 空白孔。 5 結(jié)合物：堿性磷酸酶標(biāo)記的綿羊單克隆抗-NT-proBNP 抗體+ 防腐劑（400 µL）。 6 -7 - 8 TRIS NaCl Tween（pH 7.3）+ 防腐劑（600 µL）。 9 空白孔。 10 含底物的讀取孔：4-甲基傘形酮磷酸鹽（0.6 mmol/L）+ 二乙醇胺（DEA*）（0.62 N 端腦鈉肽前體測定試劑盒（酶聯(lián)免疫熒光法） 版本號 9301622 D - 2015/01 3 mmol/L 或 6.6%. pH 9.2）+ 1 g/L 疊氮鈉（300µL）。 *警示詞：危險 危害： H318：造成嚴(yán)重眼部刺激。 預(yù)防措施： P280：配戴防護(hù)手套/護(hù)目鏡/面罩。 P305+P351+P338：如入眼：用清水小心沖洗數(shù)分鐘。如果配戴隱形眼鏡并方便摘除，摘除隱形眼 鏡后繼續(xù)沖洗。 詳情參見“材料安全性數(shù)據(jù)表"。 試驗(yàn)所需的但試劑盒未提供的材料 - 用于分裝 200µL 液體的帶一次性吸頭的加樣槍。 - 無滑石粉的一次性手套。 - 對于其他具體材料和一次性耗材，請參見儀器用戶手冊。 - VIDAS 系列儀器。

【儲存條件及有效期】 儲存條件 • 在 2～8℃，有效期 12 個月。 • 禁止冷凍。 • 將所有未使用的試劑存放在 2-8℃下。 • 打開試劑盒后，檢查確認(rèn) SPR 袋子正確密封且無損壞。如果不合格，禁止使用 SPRs。 • 使用后在內(nèi)部放置干燥劑并將袋子仔細(xì)密封以保持 SPRs 的穩(wěn)定性，并將整個試劑盒放回至 2-8℃條件 下。 • 若按照上述規(guī)定條件貯藏，所有組分在有效期內(nèi)保持穩(wěn)定。 生產(chǎn)日期：詳見外包盒標(biāo)簽。 失效日期：詳見外包盒標(biāo)簽。

【適用儀器】 VIDAS，mini VIDAS，VIDAS 3